Mach1-T1 Chemically Competent Cell 產品說明書
產品規格（CAT#: DL1015）
Mach1-T1: 100μl/支
pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl
保存條件(保質期)： -80℃（6個月）
基因型
F- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
產品說明
Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來，是目前生長速度較快的感受態細胞之一，在平板上 8h可見克隆，缺失核酸內切酶(endA)，提高了質粒DNA的產量和質量；重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩定性；lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于藍、白斑篩選；tonA突變賦予Mach1-T1菌株對噬菌體T1和T5的抗性。Mach1-T1感受態細胞經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>109cfu/μg DNA。
操作方法
1.
Mach1-T1感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質?；蜻B接產物) 并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4.
5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少13小時。
注意事項
1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
說明書下載
Mach1-T1 Chemically Competent Cell 產品說明書
