今天是2020年12月30日 星期三,歡迎光臨本站 上海唯地生物技術有限公司 網址: www.qtnzkvz.buzz

克隆感受態_熱激

Mach1-T1

文字:[大][中][小] 2015-8-26    瀏覽次數:5811    

  Mach1-T1 Chemically Competent Cell 產品說明書 




產品規格(CAT#: DL1015)

Mach1-T1:                                                       100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                         10μl

保存條件(保質期):                                 -80℃(6個月)


基因型

F- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA


產品說明

Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來,是目前生長速度較快的感受態細胞之一,在平板上 8h可見克隆,缺失核酸內切酶(endA),提高了質粒DNA的產量和質量;重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA的穩定性;lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于藍、白斑篩選;tonA突變賦予Mach1-T1菌株對噬菌體T1和T5的抗性。Mach1-T1感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>109cfu/μg DNA。


操作方法

1. Mach1-T1感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質?;蜻B接產物) 并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少13小時。


注意事項

1. 感受態細胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。


說明書下載

Mach1-T1 Chemically Competent Cell 產品說明書



返回上一步
打印此頁
[向上]
在線客服

銷售QQ

技術QQ

咨詢電話:
021-34790199

請掃描二維碼
打開手機站

血战技巧十句口诀 体彩大乐透开奖 手机棋牌游戏 3d组6复式投注技巧 河内五分彩倍投方案 AG视讯哪里玩靠谱 辽宁11选5智能选号 排列五和值走势图连线 福彩快乐12数据分析工具 乐山在线棋牌 皇玺彩票官方网站-Welcome 3d组选6中奖计算方法 mg视讯信誉平台 笨重的生肖动物 足彩半全场投注 快乐赛车计划软件 郑州期货交易所